Two MSCs lead cell-based therapy

Challenge with Mesenchymal Stem Cells and Marrow Stromal Cells

無題

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Manami

Injection of 2013, 2018 and 2020 into muscle and kidney of SCID mice at Dec 10, 2015.

Albumin expression by qRT-PCR (Ct mean) (Relative expression)
2013 (25.2) (1.4)
2040 (23.8) (1.5)
2018 (21.5) (3.4)
2020 (24.2) (0.9)
2023D (27.8) (0.9)
Liver bud (20.5) (27.9)
HepaRG (20.6) (21)
Liver (18.6) (1000)

Plan:
1. Gene chip analysis of Kiy-Hep cells
2. Riphanpsin, Omeprazol, Phenobarbital
3. Deposition of the cells to NIHS
5. Integration of the transgenes, e.g. TERT.
6. qRT-PCR
7. Phase contrast photomicrograph.
8. Cell information from Tohru.
10. Karyotype.
11. Flowcytometry.
14. Subcutaneous and intramuscular implantation of a large number of the cells.

Sample Name




Implantation of Kiy-Hep cells
Cell
1. Hep2044 (Yu)---Tendon or myocytes, but no hepatocytes.
2. Hep2020---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
3. Hep2004---No phenotypes (no hepatocytes) by four replicates or injection.
4. Hep2013 (Yu)---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
5. Hep2017---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
6. Hep2018---injection done.
7. Hep2040---injection done.
8.  Hep2045---injection done.
9.  Hep2022D---injection done.
10. Hep2023D---injection done.
11. Hep2039D---injection done.

Experiment
1. Implantation of the cells into subcapsular region.
2. Myocytic differentiation
3. Possibly tendon-like morphology


肝細胞名 状態 細胞数(×10e6) Passage チューブ本数 年齢 性別 疾患名等 肝臓重量 分離方法
Hep2004 Rec-Hepatocyte 6.0 P1 4     胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2004 Rec-Mix 14.2 P1 4     胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2005 Rec-PPT 11.0 P2PD5 2 7か月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2006 Rec-PPT 3.5 P1PD1 1 2歳8ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2006 Rec-SUP 5.4 P1PD1 1 2歳8ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2007 Rec-SUP 1.3 P1PD2 2 1歳1ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 全肝重量296g。肝断片重量76g。 Collagenase灌流
Hep2009 Rec-PPT 10.0 P1PD2 1 5ヶ月 胆道閉鎖症 全体199g、検体26g Collagenase灌流
Hep2009 Rec-SUP 3.5 P1PD2 1 5ヶ月 胆道閉鎖症 全体199g、検体26g Collagenase灌流
Hep2009 Don-SUP 4.7 P1PD1 1 31歳   84g+54g(84gを分離、54gは凍結) Collagenase灌流
Hep2012 Rec-SUP2 2.4 Fresh 1 8ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植   Collagenase灌流
Hep2013 Rec-PPT 5.0 Fresh 1 3歳10ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 総肝重量478g 肝断片重量103g Collagenase灌流
Hep2013 Rec-SUP1 3.2 Fresh 1 3歳10ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 総肝重量478g 肝断片重量103g Collagenase灌流
Hep2013 Rec-SUP2 2.3 Fresh 1 3歳10ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 総肝重量478g 肝断片重量103g Collagenase灌流
Hep2013 Rec-SUP3 6.2 Fresh 2 3歳10ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 総肝重量478g 肝断片重量103g Collagenase灌流
Hep2014 Rec-PPT 2.2 Fresh 1 2歳1ヶ月 プロピオン酸血症に対する生体肝移植 総肝重量644g 肝断片重量131g Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された
Hep2014 Rec-SUP1 9.7 Fresh 2 2歳1ヶ月 プロピオン酸血症に対する生体肝移植 総肝重量644g 肝断片重量131g Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された
Hep2014 Rec-SUP2 2.6 Fresh 1 2歳1ヶ月 プロピオン酸血症に対する生体肝移植 総肝重量644g 肝断片重量131g Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された
Hep2014 Rec-SUP3 4.0 Fresh 1 2歳1ヶ月 プロピオン酸血症に対する生体肝移植 総肝重量644g 肝断片重量131g Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された
Hep2015 Rec-SUP2 25.0 Fresh 1 1歳1ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 全393g 内 63g使用 Collagenase灌流
Hep2015 Rec-SUP3 11.0 Fresh 1 1歳1ヶ月 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 全393g 内 63g使用 Collagenase灌流
Hep2015 Don-SUP3 20.0 Fresh 1 40歳      
Hep2017 Rec-SUP1 31.0 Fresh 1 1歳3ヶ月 糖原病Ib型に対する生体肝移植 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。
Hep2017 Rec-SUP2 31.0 Fresh 1 1歳3ヶ月 糖原病Ib型に対する生体肝移植 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。
Hep2018 Rec-SUP2+SUP3 2.2 Fresh 1 4歳 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 全肝重量 450g。肝断片(左葉)重量 26g。 Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液45mLをもらった。ビリルビンの蓄積はない。見た目は正常な色だが、繊維化が進行していた。実質細胞が採取しづらい
Hep2020 Rec-SUP1 76.0 Fresh 2 6歳 先天性肝線維症に対する生体肝移植 全肝重量 804g、検体111g Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。メッシュで1回ろ過。Clude細胞液65mLをもらった。繊維化が進行していたため組織が硬かったが、コラゲナーゼ処理後、組織はかなり柔らかくなった。
Hep2022 Don-SUP2 29.0 Fresh 1 26歳   67.5g Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。
Hep2022 Don-SUP3 4.5 Fresh 1 26歳   67.5g Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。
Hep2023 Don-SUP1 73.0 Fresh 1 32歳     Collagenase灌流.正常肝組織 白色脂肪が多い。全体的に白濁。黄色い脂肪はない。予想外に細胞が得られなかった。1回目の遠心でDNA塊のようなドローっとしたものが沈殿したので、沈殿塊を除去した細胞懸濁液を再度40um穴セルストレーナーでろ過してから使用した。
Hep2039 Don-SUP1 45.0 Fresh 1 36歳 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植。ドナー肝。   Collagenase灌流
Hep1039 Don-SUP2 11.5 Fresh 1 36歳 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植。ドナー肝。   Collagenase灌流
Hep2040 Rec-SUP1 100.0 Fresh 4 7ヶ月 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 全肝重量489g、肝断片重量70g。 Collagenase灌流
Hep2040 Rec-SUP2 41.0 Fresh 2 7ヶ月 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 全肝重量489g、肝断片重量70g。 Collagenase灌流
Hep2040 Rec-SUP3 17.0 Fresh 1 7ヶ月 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 全肝重量489g、肝断片重量70g。 Collagenase灌流
Hep2041 Rec-PPT 0.3 Fresh 1 2歳7ヶ月 MMA(メチルマロン酸血症)に対する生体肝移植 全肝重量1412g、検体断片重量94g  Collagenase灌流
Hep2044 Rec-PPT 12.0 Fresh 4 5ヶ月 原因不明肝硬変(胆道閉鎖症の疑い強い、病理診断にて確定の見込み) 全肝重量314g、肝断片重量41g。 Collagenase灌流
Hep2045 Rec-SUP1 64.0 Fresh 2 15歳 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 Collagenase灌流
Hep2045 Rec-SUP2+3 13.7 Fresh 1 15歳 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。

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