Injection of 2013, 2018 and 2020 into muscle and kidney of SCID mice at Dec 10, 2015.
Albumin expression by qRT-PCR (Ct mean) (Relative expression)
2013 (25.2) (1.4)
2040 (23.8) (1.5)
2018 (21.5) (3.4)
2020 (24.2) (0.9)
2023D (27.8) (0.9)
Liver bud (20.5) (27.9)
HepaRG (20.6) (21)
Liver (18.6) (1000)
Plan:
1. Gene chip analysis of Kiy-Hep cells
2. Riphanpsin, Omeprazol, Phenobarbital
3. Deposition of the cells to NIHS
5. Integration of the transgenes, e.g. TERT.
6. qRT-PCR
7. Phase contrast photomicrograph.
8. Cell information from Tohru.
10. Karyotype.
11. Flowcytometry.
14. Subcutaneous and intramuscular implantation of a large number of the cells.
Implantation of Kiy-Hep cells
Cell
1. Hep2044 (Yu)---Tendon or myocytes, but no hepatocytes.
2. Hep2020---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
3. Hep2004---No phenotypes (no hepatocytes) by four replicates or injection.
4. Hep2013 (Yu)---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
5. Hep2017---No hepatocytes (were sacrificed on Nov 22).
6. Hep2018---injection done.
7. Hep2040---injection done.
8. Hep2045---injection done.
9. Hep2022D---injection done.
10. Hep2023D---injection done.
11. Hep2039D---injection done.
Experiment
1. Implantation of the cells into subcapsular region.
2. Myocytic differentiation
3. Possibly tendon-like morphology
| 肝細胞名 | 状態 | 細胞数(×10e6) | Passage | チューブ本数 | 年齢 | 性別 | 疾患名等 | 肝臓重量 | 分離方法 |
| Hep2004 | Rec-Hepatocyte | 6.0 | P1 | 4 | | | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2004 | Rec-Mix | 14.2 | P1 | 4 | | | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2005 | Rec-PPT | 11.0 | P2PD5 | 2 | 7か月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2006 | Rec-PPT | 3.5 | P1PD1 | 1 | 2歳8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2006 | Rec-SUP | 5.4 | P1PD1 | 1 | 2歳8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2007 | Rec-SUP | 1.3 | P1PD2 | 2 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全肝重量296g。肝断片重量76g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Rec-PPT | 10.0 | P1PD2 | 1 | 5ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症 | 全体199g、検体26g | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Rec-SUP | 3.5 | P1PD2 | 1 | 5ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症 | 全体199g、検体26g | Collagenase灌流 |
| Hep2009 | Don-SUP | 4.7 | P1PD1 | 1 | 31歳 | 男 | | 84g+54g(84gを分離、54gは凍結) | Collagenase灌流 |
| Hep2012 | Rec-SUP2 | 2.4 | Fresh | 1 | 8ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-PPT | 5.0 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP1 | 3.2 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP2 | 2.3 | Fresh | 1 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2013 | Rec-SUP3 | 6.2 | Fresh | 2 | 3歳10ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 総肝重量478g 肝断片重量103g | Collagenase灌流 |
| Hep2014 | Rec-PPT | 2.2 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP1 | 9.7 | Fresh | 2 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP2 | 2.6 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2014 | Rec-SUP3 | 4.0 | Fresh | 1 | 2歳1ヶ月 | 女 | プロピオン酸血症に対する生体肝移植 | 総肝重量644g 肝断片重量131g | Collagenase灌流。組織量多く、酵素処理でほぐれやすかった。よって細胞懸濁液は1人当たり95mL供与された |
| Hep2015 | Rec-SUP2 | 25.0 | Fresh | 1 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全393g 内 63g使用 | Collagenase灌流 |
| Hep2015 | Rec-SUP3 | 11.0 | Fresh | 1 | 1歳1ヶ月 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全393g 内 63g使用 | Collagenase灌流 |
| Hep2015 | Don-SUP3 | 20.0 | Fresh | 1 | 40歳 | 男 | | | |
| Hep2017 | Rec-SUP1 | 31.0 | Fresh | 1 | 1歳3ヶ月 | 女 | 糖原病Ib型に対する生体肝移植 | 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ | Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。 |
| Hep2017 | Rec-SUP2 | 31.0 | Fresh | 1 | 1歳3ヶ月 | 女 | 糖原病Ib型に対する生体肝移植 | 全肝重量 828g。肝断片重量 記載漏れ | Collagenase灌流。硬変少し。かなり重度な脂肪肝。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液50mLをもらった。 |
| Hep2018 | Rec-SUP2+SUP3 | 2.2 | Fresh | 1 | 4歳 | 女 | 胆道閉鎖症に対する生体肝移植 | 全肝重量 450g。肝断片(左葉)重量 26g。 | Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液45mLをもらった。ビリルビンの蓄積はない。見た目は正常な色だが、繊維化が進行していた。実質細胞が採取しづらい |
| Hep2020 | Rec-SUP1 | 76.0 | Fresh | 2 | 6歳 | 男 | 先天性肝線維症に対する生体肝移植 | 全肝重量 804g、検体111g | Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。メッシュで1回ろ過。Clude細胞液65mLをもらった。繊維化が進行していたため組織が硬かったが、コラゲナーゼ処理後、組織はかなり柔らかくなった。 |
| Hep2022 | Don-SUP2 | 29.0 | Fresh | 1 | 26歳 | 男 | | 67.5g | Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。 |
| Hep2022 | Don-SUP3 | 4.5 | Fresh | 1 | 26歳 | 男 | | 67.5g | Collagenase灌流。ガーゼで1回ろ過。Clude細胞液約100mLをもらった。 |
| Hep2023 | Don-SUP1 | 73.0 | Fresh | 1 | 32歳 | 男 | | | Collagenase灌流.正常肝組織 白色脂肪が多い。全体的に白濁。黄色い脂肪はない。予想外に細胞が得られなかった。1回目の遠心でDNA塊のようなドローっとしたものが沈殿したので、沈殿塊を除去した細胞懸濁液を再度40um穴セルストレーナーでろ過してから使用した。 |
| Hep2039 | Don-SUP1 | 45.0 | Fresh | 1 | 36歳 | 女 | 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植。ドナー肝。 | | Collagenase灌流 |
| Hep1039 | Don-SUP2 | 11.5 | Fresh | 1 | 36歳 | 女 | 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植。ドナー肝。 | | Collagenase灌流 |
| Hep2040 | Rec-SUP1 | 100.0 | Fresh | 4 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2040 | Rec-SUP2 | 41.0 | Fresh | 2 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2040 | Rec-SUP3 | 17.0 | Fresh | 1 | 7ヶ月 | 男 | 肝内胆汁うっ滞症(アラジール症候群疑い)に対する生体肝移植。レシピエント肝。 酵素処理後も組織は硬く、細胞懸濁液も組織もビリルビンが大量に蓄積していた。とても緑色。 | 全肝重量489g、肝断片重量70g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2041 | Rec-PPT | 0.3 | Fresh | 1 | 2歳7ヶ月 | 女 | MMA(メチルマロン酸血症)に対する生体肝移植 | 全肝重量1412g、検体断片重量94g | Collagenase灌流 |
| Hep2044 | Rec-PPT | 12.0 | Fresh | 4 | 5ヶ月 | 女 | 原因不明肝硬変(胆道閉鎖症の疑い強い、病理診断にて確定の見込み) | 全肝重量314g、肝断片重量41g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2045 | Rec-SUP1 | 64.0 | Fresh | 2 | 15歳 | 男 | 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植 | 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 | Collagenase灌流 |
| Hep2045 | Rec-SUP2+3 | 13.7 | Fresh | 1 | 15歳 | 男 | 胆道閉鎖症(BA)に対する生体肝移植 | 全肝重量 964g、肝断片重量 141g。 |